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当前学科:网站建设与管理
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与大部分mRNA不同,组蛋白mRNA的3'-末端没有多聚A尾巴,相反,它们是从一个较长前体基环结构3'-末端相距几个核苷酸的位点切下来的。这一组蛋白前体的正确加工还有赖于断裂位点上的一段保守序列,用海胆做的实验显示这段保守序列可与U7snRNP的RNA组分作用。 你正在研究哺乳动物细胞中组蛋白mRNA的加工,想了解是否这一作用决定了它的3'-末端。如图8-3-30A所示,在海胆和人的组蛋白mRNA的3'-末端间存在惊人的相似。已知人细胞核的抽提物可正确地切除标记过的组蛋白mRNA前体。此外,如果用核酸酶去消化抽提物中的RNA,提取物不再能对加入的组蛋白前体mRNA切割了。通过加入一些含snRNP,部分纯化过的成分又能使抽提物恢复活性。 为了更详细地研究加工反应,将对应于snRNP上与组蛋白前体作用的假定位点周围区域综合成了三段DNA寡核苷酸。一段对应于人中的保守序列,一段对应于老鼠的,另一段对应于比较所有哺乳动物的保守序列后得到的公有序列。将这些寡聚核苷酸与加有RNaseH(可消除DNA-RNA双螺旋中的RNA)的抽提物预保温,后两种寡聚核苷酸完全阻断了前体的加工,而人的没有。这两种抑制性寡聚核苷酸抽提物中的63个核苷酸的snRNA消失了。你已成功地纯化了这种snRNA,并查明了其5'-末端的序列。
施工过程中,圆曲线的测设元素不包括下列哪一项()。