A . 首先要将突变基因克隆到突变载体
B . 需要使用连接酶封闭缺口
C . 突变位点位于载体上
D . 保真度比重组PCR定点突变要高
E . 含有突变位点的重组载体可转化大肠杆菌体内进行扩增