A . 分离和培养待测细胞B . 染色与分析：用荧光素标记的细胞因子特异性单克隆抗体做荧光抗体染色C . 封闭非特异性结合位点D . 细胞固定：多为4%多聚甲醛E . 不同荧光素标记两种以上细胞因子的单克隆抗体，不能同时检测同一细胞内2种以上不同细胞因子
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